مقاله جداسازی و شناسایی مولکولی بروسلا در دامهای مشکوک (گاو) شهرستان تنکابن

توضیحات

  مقاله جداسازی و شناسایی مولکولی بروسلا در دامهای مشکوک (گاو) شهرستان تنکابن دارای 2 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله جداسازی و شناسایی مولکولی بروسلا در دامهای مشکوک (گاو) شهرستان تنکابن  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله جداسازی و شناسایی مولکولی بروسلا در دامهای مشکوک (گاو) شهرستان تنکابن،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن مقاله جداسازی و شناسایی مولکولی بروسلا در دامهای مشکوک (گاو) شهرستان تنکابن :

تعداد صفحات:2

چکیده:

بروسلوزیس یکی از مهمترین بیماریهای عفونی مشترک بین حیوان و انسان است. عامل مؤثر بروسلوزیس باکتریهای کوکوباسیل گرم منفی و درون سلولی امتیازی هستند که به جنس بروسلا تعلق دارند. بروسلاها متعلق به زیر گروه آلفا دوپروتنو باکتریها می باشند که اخیراً نه گونه از بروسلا شناسایی شده اند، هفت گونه از آنها که حیوانات را آلوده می کنند. بروسلوزیس یک بیماری سیستمیک بوده و راه ورود باکتری می تواند از مسیر مخاط تنفسی، گوارشی، اداری-تناسلی، چشم و پوست باشد. شیوع جغرافیایی بروسلوزیس وسیع بوده و تقریباً در تمام نقاط دنیا مشاهده می شود و سبب خسارت اقتصادی بسیار مهمی در صنعت دامپروری و بهداشت جوامع می گردد. بروسلوزیس سبب سقط جنین، باقی مانده جفت در رحم، اختلال باوری، کاهش تولید شیر در میزبان اصلی می شود. در انسان این علائم متنوع است.تظاهرات اولیه بیماری شامل تب، لرز، تعریق زیاد و گاهاً سستی و ضعف و کسالت، بزرگ شدن طحال، کبد و غدد لنفاوی می باشد. مبارزه با این بیماری و کنترل و ریشه کنی آن به دلیل کثرت گونه ای عوامل بیماریزا، حیوانات میزبان، دوام نسبتاً قابل توجه باکتری در محیط، عدم کفایت برنامه ریزی و واکسیناسیون برای ریشه کنی بیماری و لزوم هزینه شدن سرمایه سنگین اقتصادی در بسیاری از کشورهای جهانبا دشواریها و مشکلات عمده ای مواجه است. کشتهای باکتریولوژیکی و تست های سرولوژیکی شایعترین آزمونها در تشخیص عفونت هستند در اغلب موارد تشخیص بروسلوز دشار است و دلیل این دشواری نه فقط به خاطر شباهت بالینی این بیماری با بسیاری از بیماری های عفونی و غیر عفونی می باشد بلکه در اغلب موارد روشهای تشخیصی قادر به جداسازی ارگانیسم نمی گرددد. ابداع تکنیکهای جدید تشخیصی از یک طرف منجر به ردیابی و شناسایی سریع بروسلا می شود و از طرف دیگر خطر عفونت با این ارگانیسم را در آزمایشگاه به حداقل می رساند. PCR از جمله روش هایی است که این مزایا را دارد. اهداف تحقیق: هدف از انجام این مطالعه ارزیابی روش PCR به عنوان ابزار تشخیصی کارآمد در تشخیص گاوهای آلوده می باشدو فراوانی بیماری بر حسب روش سرولوژی و مولکولی و مقایسه این دو روش و بهینه سازی شرایط PCR نیز انجام می شود. روش تحقیق: ابتدا از دامهای اهلی (گاو) مشکوک به بروسلوزیس با رعایت شرایط و ضوابط بهداشتی نمونه خون محیطی گرفته شد. خونهای اخذ شده به همراه فرمهای ثبت مشخصات دام جهت تشخیص بروسلوز به آزمایشگاه ارسال شد و سرم آن نیز جدا گردید. یک غربالگری اولیه به روش سرولوژی رزبنگال بر روی 50 نمونه سرمی صورت گرفت. موارد مثبت در این بررسی بوسیله آزمون رایت لوله ای و از تیتر 1/ 80 بالاتر ملاک نظر قرار گرفت. 13 مورد مثبت در تسترزبنگال، مثبت گزارش شد که بعد از ارزیابی با روش رایت لوله ای و 2ME به همراه چند عدد رزبنگال منفی مورد بررسی مولکولی قرار گرفت که در این روش استخراج DNA توسط کیت DNA-RIBO-SORB nucleic acid extraction انجام شده است که برای استخراج و خالص سازی DNA و RNA از نمونه های بیولوژیکی مختلف به کار می رود. یافته ها: نتایج آزمون 2ME بر روی موارد مثبت رزبنگال به این صورت می باشد. دو نمونه تیتر 4/ 40 ، یک نمونه تیتر 80/2 ، یک نمونه تیتر 1/ 20 ، پنج نمونه تیتر 1/ 80 ، یک نمونه تیتر 3/40 و سه نمونه تیتر 4/ 80 و در تست رایت لوله ای چهار نمونه تیتر 4/ 80 ، هفت نمونه تیتر 3/ 80 ، یک نمونه تیتر 2/40 و یک نمونه تیتر 4/ 40 مشاهده گردید. آنالیز نتایج PCR براساس حضور یا عدم حضور باندهای DNA تکثیر شده در ژل آگارز دودرصد است. اندازه ی قطعات DNA تکثیر شده یبه صورت bp460 برای گونه های بروسلا و bp770 برای اینترنال کنترل می باشد. تست مولکولی بر روی 30 نمونه شامل نمونه های کنترل منفی و مثبت و 15 نمونه رزبنگال منفی و موارد مثبت رزبنگال انجام شد. بعد از فرآیند تکثیر، نمونه ها روی ژل برده و الکتروفورز گردید و باندهای مورد نظر در دستگاه ترنس لومیناتور مجهز به دوربین تحت نور uv مشاهده و مورد عکسبرداری قرار گرفت. از 30 نمونه، 3 نمونه PCR مثبت بودند که هر 3 نمونه تیتر رایت لوله ای و 2ME ، 80/4 را داشته اند. بحث و نتیجه گیری: امروزه بروسلوزیس به علت شیوع گسترده در منلطق مختلف دنیا به عنوانیکی از مهمترین عوامل تهدید کننده سلامت امعه معرفی می گردد. از آنجا که در تشخیص بروسلوز تکنیک های کشت، وقت گیر بوده و فاقد حساسیت لازم است و کار مداوم با این ارگانیسم در آزمایشگاه مخاطره آمیز است، روشهای سرولوژی نیز اختصاصیت کافی ندارد و با توجه به مقایسه های سرولوژی و PCR به این نتیجه می رسیم که اختلاف مشاهده به علت عدم حساسیت مناسب تست های سرولوژی می باشد و PCR به عنوان یک روش مناسب در تشخیص بروسلوزیس پیشنهاد می شود.

برای دریافت اینجا کلیک کنید